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固相萃取儀基本操作：

　　1.活化

　　萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml溶劑沖洗濾膜使SPE填料保持濕潤，因為填料干燥會降低樣品保留值，而各小柱的干燥程度不一，也會影響回收率的重現(xiàn)性。先用甲醇等水溶性有機溶劑沖洗填料，因為甲醇能潤濕吸附劑表面，并滲透到非極性的硅膠鍵合相中，使硅膠更容易被水潤濕；然后再加入水或緩沖液沖洗，創(chuàng)造和樣品溶劑相容的環(huán)境并提高回收率。

　　2.上樣

　?、儆?.1mol/L酸或堿調節(jié)，使pH=9，離心取上層液萃??；

　?、谟眉状?、乙腈等沉淀蛋白質后取上清液，以水或緩沖液稀釋后萃取；

　?、塾盟峄驘o機鹽沉淀蛋白質后取上清液，調節(jié)pH值后萃?。?/p>

　?、艹?5min后加入水、緩沖液，取上清液萃取。流速應控制為1ml/min，流速快不利于待測物與固定相結合。

　　3.淋洗

　　反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液，可在清洗液中加入少量有機溶劑、無機鹽或調節(jié)pH值。加入小柱的清洗液應不超過一個小柱的容積，而SPE濾膜為5-10ml。

　　4.洗脫

　　應選用5-10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度，則可先將洗脫液揮干后，再用流動相重組殘留物后進樣。體內樣品洗脫后多含有水，可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE填料可用小體積、較弱的洗脫液洗下待測物，再用極性較強的HPLC分析柱如C18柱分析洗脫物。